液相色譜法檢測(cè)復(fù)方蘆丁片中主要成分

一  引言
復(fù)方蘆丁片屬于維生素類藥，主要用于高血壓病的輔助治療，其主要成分為蘆丁和維生素C（圖1為其分子結(jié)構(gòu)圖）。蘆丁是維生素P的一種，具有維持血管抵抗力、降低其通透性、減少脆性及抗炎、抗病毒等作用；維生素C為人體必需的營(yíng)養(yǎng)成分，臨床用于壞血病的預(yù)防及治療，可增加對(duì)感染的抵抗力[1]。

 
 
圖1 蘆丁和維生素C的分子結(jié)構(gòu)
Figrue 1 The stucture of Rutin and Vintamin C
蘆丁[2，3]和維C[4，5]的測(cè)定方法有很多，其中液相色譜法[6，7]較多被應(yīng)用，陳剛等[8]以碳圓盤電極為工作電極，用液相色譜法測(cè)定了復(fù)方蘆丁片中的蘆丁和維C。本文以碳纖維微電極為工作電極，采用液相色譜法同時(shí)測(cè)定了復(fù)方蘆丁和維C。
二  實(shí)驗(yàn)部分
1 儀器和試劑
STI5000液相色譜儀（上海禾工科學(xué)儀器有限公司）； PH620型便攜式酸度計(jì)；電化學(xué)測(cè)量采用三電極系統(tǒng)，超聲波清洗器（天津東康），溶劑過(guò)濾器 （天津東康）。甲醇：乙腈70：30。
蘆丁（baicalin）對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所），維生素C（分析純，北京化工廠），復(fù)方蘆丁片（北京市燕京制藥廠，批號(hào)981104），其它試劑均為分析純，試驗(yàn)用水為二次重蒸水。
2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
準(zhǔn)確稱取蘆丁和維生素C，分別用適量乙醇及水溶解，使?jié)舛葹?.0mg/mL，以0.45μm濾膜過(guò)濾后備用。
3 樣品溶液的制備
準(zhǔn)確稱取復(fù)方蘆丁片10片（每片標(biāo)示值0.1g），獲得一片藥的平均重量，用研缽研成細(xì)粉，準(zhǔn)確稱取相當(dāng)于5片藥片質(zhì)量的粉末于盛有50ml 40mmol/L硼砂-乙醇 （體積比1：1）混合溶液的燒杯中，于50oC水浴中預(yù)熱15min后，超聲助溶2min，經(jīng)普通濾紙過(guò)濾，濾液定容于50ml容量瓶中，即得復(fù)方蘆丁片樣品溶液，以0.45μm濾膜過(guò)濾后備用。
 
三、結(jié)果與討論
 
 
 
4 工作曲線及檢測(cè)限
在上述實(shí)驗(yàn)條件下，對(duì)一系列蘆丁和維C的標(biāo)準(zhǔn)混合樣品進(jìn)行分析測(cè)定，測(cè)定其峰電流與濃度的關(guān)系，所得蘆丁和維C的回歸方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)及檢測(cè)限如表1所示。
 
 
 
表1 蘆丁和維C的回歸方程及檢測(cè)限
Table 1 The regression equations and the detection limits of Rutin and Vitamin C
回歸方程          相關(guān)系數(shù)         線性范圍         檢測(cè)限
化合物      Y=a+bX*                            （mg/ml）         （mg/ml）
蘆丁      Y=1.99+79.1X         0.9963         8.0×10-5~0.5     5.0×10-5
維C      Y=10.9+89.5X         0.9924         5.0×10-5~0.5     2.0×10-5
*Y和X分別表示 峰電流（nA）及被測(cè)物濃度（mg/ml）  （The Y and X are the peak current and concentration of the analytes）
**檢測(cè)限按信噪比為3計(jì)算（The detection limits are estimated on the basis of a signal to noise ratio of 3）
2.5 精密度實(shí)驗(yàn)
濃度為0.1mg/ml的蘆丁和維C對(duì)照品溶液各平行進(jìn)樣6次,測(cè)得蘆丁峰高的RSD為1.1%，遷移時(shí)間的RSD為1.8%；維C峰高的RSD為2.2%，遷移時(shí)間的RSD為1.4%。

圖3 實(shí)際樣品的色譜圖
Fig.3 The electropherograms of S
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